December 04,2018
来源：中国医学论坛报今日肿瘤
当地时间2018年12月1日~4日，第60届美国血液病学会（ASH）年会在美国加利福尼亚州圣地亚哥召开。ASH 年会是由美国血液学会协会（ASH）主办的年度盛会，该组织是全球最大的关于血液疾病病因及治疗的专业协会，其使命是通过促进血液学的研究、临床护理、教育、培训及宣传而进一步促进对血液、骨髓、免疫、凝血及脉管系统疾病的了解、诊断与防治。
本届ASH年会中国学者携多项组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）相关研究亮相，向全球血液病领域专家学者展示了这一药物在血液病诊疗中展开的探索和发挥的作用。本报现整理各项研究内容形成系列报道，将陆续发布，以期让广大读者共同聆听“中国好声音”。
南开大学天津市人民医院肿瘤诊疗中心王华庆、柳凤亭教授团队开展的《新型HDACi西达本胺逆转靶向耐药治疗恶性淋巴瘤的体内外研究》被大会选为壁报展示交流亮相本次大会，现将最新研究结果详情及专家点评为您呈现如下。
研究详情
研究背景
组蛋白去乙酰化酶（HDACs）是导致肿瘤发生的关键蛋白质。HDACs通过去除组蛋白中的乙酰基来逆转染色质乙酰化并改变癌基因和抑癌基因的转录。 HDACi被认为是有前景的抗癌药物，特别是与其他标准治疗方案联合使用。西达本胺是一种新型口服HDACi药物，可选择性抑制I类HDAC1，HDAC2和HDAC3以及IIb类HDAC10。中国食品与药品监督管理总局（CFDA）于2014年批准将西达本胺用于治疗复发或难治性外周T细胞淋巴瘤。
弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是最具侵袭性的B细胞淋巴瘤。R（利妥昔单抗，一种抗CD20单克隆抗体）+CHOP（环磷酰胺，多柔比星，长春新碱和泼尼松）方案显著改善了DLBCL患者的预后。但R-CHOP方案治疗患者的同时会诱导CD20基因的去乙酰化，下调CD20蛋白的表达，导致患者对R-CHOP方案出现耐药。
为此，研究者假设对HDACs进行抑制可以克服利妥昔单抗介导的CD20下调并促进利妥昔单抗诱导的DLBCL肿瘤生长抑制。 研究旨在确定西达本胺和利妥昔单抗在体外和体内治疗DLBCL的协同作用。
材料与方法
通过Gene Expression Omnibus（GEO）库获取使用R-CHOP方案或CHOP方案治疗的DLBCL患者的CD20（MS4A1）mRNA表达水平和临床疗效。通过Cox回归分析CD20表达与总生存期（OS）的关联，并通过X-tile软件计算截点。
通过流式细胞术分析CD20蛋白表面表达和利妥昔单抗诱导的细胞死亡。用含有或不含利妥昔单抗（10 μg/ ml）的一系列浓度的西达本胺处理5种DLBCL细胞系（OCI-LY3、OCI-LY7、Su-DHL6、Su-DHL8和Su-DLH10）24小时后，通过MTT试验测定西达本胺的IC50和利妥昔单抗的协同作用。使用ComboSyn软件计算协同作用以获得组合指数（CI）。
在体内实验中，将人DLBCL细胞系OCI-LY7注射到6周BALB / C裸鼠中以制作异种移植物DLBCL小鼠模型。在肿瘤可触及后将小鼠分成四组，每天注射生理盐水（对照组）、利妥昔单抗、西达本胺以及利妥昔单抗+西达本胺3周。在治疗期间及时测量肿瘤的体积。
研究结果
在R-CHOP方案治疗的DLBCL患者（n=233）中，CD20高表达的有137例，CD20低表达的有96例，分析发现CD20的表达与患者临床获益呈正相关[P=0.0038，风险比（HR）=0.4753，95%可信区间为0.274~0.779]； CD20的表达水平与仅采用CHOP方案治疗的DLBCL患者的临床获益没有相关性（n=183）。
5种DLBCL细胞系中CD20蛋白表面表达水平与细胞对利妥昔单抗诱导的细胞死亡的敏感性呈正相关（P=0.0018，HR=0.88）。在这些DLBCL细胞系中检测到HDAC1、HDCA2和HDCA3蛋白。
利妥昔单抗治疗显著降低CD20表达，但用西达本胺治疗后显著增加DLBCL细胞中CD20的表达。用西达本胺和利妥昔单抗联合治疗的CI值是<0.01（非常强的协同作用）或<0.3（强协同作用），表明西达本胺可增强利妥昔单抗诱导的细胞死亡。
在体内实验中，我们发现单独使用利妥昔单抗或西达本胺治疗可使肿瘤体积略微缩小，但不会使肿瘤显著缩小；而西达本胺和利妥昔单抗联合治疗可显著抑制DLBCL异种移植小鼠中的肿瘤生长（P <0.0001）。与其他实验组相比，西达本胺和利妥昔单抗联合治疗的小鼠的存活时间得到了显著延长。
研究结论
该研究通过体内及体外实验，首次表明西达本胺抑制HDACs作用可协同增强利妥昔单抗诱导的肿瘤抑制作用；因此建议临床可使用CD20的表达水平来评估DLBCL患者的治疗疗效。西达本胺是一种很有前景的抗肿瘤增敏剂，可联合R-CHOP方案治疗CD20阳性的DLBCL患者。
专家点评
南开大学天津市人民医院 王华庆教授
DLBCL是侵袭性较高的B细胞淋巴瘤类型，对这类患者基本采用R-CHOP方案进行治疗，已经证实能够显著改善DLBCL患者的预后。但经过R-CHOP方案治疗的患者不可避免地会出现耐药现象。为此，探寻对R-CHOP方案耐药机制以及开发新的治疗药物在临床治疗中尤为重要。
通过本项研究课题在全国首次发现，具有表观遗传学调节的我国原创的1.1类靶向新药西达本胺，在基础机制上和动物实验中被证实能够上调B细胞淋巴瘤的细胞膜CD20的表达，找到了靶向抗体利妥昔单抗耐药的原因，为复发难治性B细胞淋巴瘤患者的治疗开辟了新的途径。同时，对老年体质差而不能接受化疗的B细胞淋巴瘤患者来讲，创新性地组成了新的治疗方案。
目前，这一转化性临床试验已经成功通过伦理学审查，即将开展II期临床试验研究。期待临床试验的不断开展，能够为临床实践提供更多的循证证据，从而为淋巴瘤患者提供生存获益！